在做細(xì)胞研究中幾乎離不開牛血清，選購(gòu)和使用牛血清往往對(duì)于實(shí)驗(yàn)的順利開展起到了關(guān)鍵的作用，但不少研究者對(duì)于牛血清還有不少疑問和誤區(qū)。四季青作為從事牛血清生產(chǎn)和開發(fā)30余年的企業(yè)，談?wù)勎覀儗?duì)于牛血清應(yīng)該如何使用和選購(gòu)的見解，希望對(duì)您的實(shí)驗(yàn)有所幫助。
如何選擇血清級(jí)別？
一般來說級(jí)別越高的血清對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)越有利，但價(jià)格相應(yīng)的也越貴。在實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)有限的情況下，全部使用最高級(jí)別的進(jìn)口血清，有時(shí)候并不十分必要，反而降低了其他試劑、耗材的品質(zhì)，增加了實(shí)驗(yàn)整體的風(fēng)險(xiǎn)。
因此四季青小助理建議您根據(jù)細(xì)胞的種類和血清試用結(jié)果選擇相應(yīng)的血清級(jí)別，一般來講，級(jí)別稍低的血清對(duì)于特定細(xì)胞的培養(yǎng)效果不一定比高級(jí)別的血清差，具體培養(yǎng)效果還是得看試用結(jié)果。
如果是干細(xì)胞、原代細(xì)胞等各種血清依賴度高的細(xì)胞及其他各類對(duì)血清質(zhì)量有較高要求的實(shí)驗(yàn)研究，建議使用優(yōu)質(zhì)的胎牛血清來進(jìn)行培養(yǎng)；
如果是對(duì)血清質(zhì)量要求相對(duì)一般、增殖能力很強(qiáng)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，采用品質(zhì)合格的普通胎牛血清、類標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清或新生牛血清也是可以的。
血清怎么保存和解凍？
四季青小助理建議您收到血清后根據(jù)外包裝說明，通常保存在-10～-30℃溫度條件下，可保存五年。使用時(shí)將血清從冷凍箱取出后，置于2～8℃冰箱使之緩慢融解，一般過夜融解。若化凍后置于2～8℃環(huán)境中建議在兩周內(nèi)使用完。如果一次無法用完整瓶血清，可以根據(jù)使用情況將血清分裝至多個(gè)無菌的容器中，冷凍保存，但在凍入低溫冰箱前，必須留有一定空間，防止血清冰凍后體積增加導(dǎo)致容器破裂。直接購(gòu)買小容量的免分裝血清則是更保險(xiǎn)的選擇。
更換血清要注意什么？
更換血清時(shí)不要以為用的是同一品牌，同一貨號(hào)的血清就可以萬事大吉，血清由于是天然產(chǎn)物，批與批之間不可避免會(huì)存在差異，因此四季青小助理建議您在更換血清時(shí)先進(jìn)行少量試用確保使用該批次的血清沒有問題。在替換時(shí)采用逐步替換的方式，將新舊批次血清分別配制成培養(yǎng)基，按一定比例混合，待細(xì)胞適應(yīng)后，完成新批號(hào)的替換。
條件允許的情況下最好一次性備足實(shí)驗(yàn)使用量的血清，避免因?yàn)轭l繁更換血清帶來的風(fēng)險(xiǎn)和提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。
血清到底要不要滅活？
血清熱滅活主要目的是去除血清中的補(bǔ)體，但熱滅活血清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的，熱滅活反而會(huì)使血清中沉淀增多。因此四季青小助理建議非特殊細(xì)胞就不需要進(jìn)行熱滅活了。
若確定您的細(xì)胞類型需要進(jìn)行熱滅活，那么請(qǐng)將化凍后的血清置于 56℃水浴中滅活30分鐘，并通過搖晃使其受熱均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多，甚至導(dǎo)致血清無法正常使用。
我的細(xì)胞怎么染菌了？
當(dāng)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細(xì)胞有輕微染菌現(xiàn)象的時(shí)候先不要馬上丟棄，因?yàn)橛械臅r(shí)候并不是真正的染菌，而可能是由于熱處理，配置時(shí)pH變化等原因?qū)е碌牡鞍缀蜔o機(jī)鹽持續(xù)析出，讓研究人員誤以為細(xì)胞被污染了。一般情況下沉淀并不會(huì)影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。
四季青小助理建議您在使用血清的時(shí)候，注意正確的血清解凍步驟，并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中。
欲去除這些沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以1000轉(zhuǎn)/分～2000轉(zhuǎn)/分稍微離心，上清液即可直接加入培養(yǎng)基內(nèi)使用。
若經(jīng)過辨別細(xì)胞確實(shí)被污染了，那么應(yīng)該對(duì)可能涉及的原因進(jìn)行排查，對(duì)環(huán)境進(jìn)行徹底消毒，相關(guān)器具、試劑、培養(yǎng)基停止使用，重新配制試劑培養(yǎng)基，對(duì)相關(guān)操作人員進(jìn)行培訓(xùn)，然后重新復(fù)蘇細(xì)胞。防止污染的二次發(fā)生。
如何選擇血清品牌？
血清市場(chǎng)魚龍混雜，有部分雜牌血清假冒進(jìn)口血清，使用的原料存在著很大的疑問，用這些雜牌血清不僅價(jià)格不低，用于培養(yǎng)細(xì)胞還有風(fēng)險(xiǎn)。因此四季青小助理建議您盡量選擇有長(zhǎng)期穩(wěn)定口碑的血清品牌，以保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
正規(guī)公司出廠的牛血清都需要經(jīng)過嚴(yán)格的多重質(zhì)檢和驗(yàn)證，除了細(xì)胞培養(yǎng)效果外還必須通過細(xì)菌、真菌、支原體、噬菌體、多種病毒以及各種性能測(cè)試，為科研人員提供保障。因此四季青小助理提醒您在選擇血清品牌時(shí)同時(shí)也要關(guān)注該品牌是否具備牛血清生產(chǎn)的資質(zhì)，以及牛血清的相關(guān)質(zhì)量合格證明。
如何辨別假貨？
由于牛血清造假比較容易，且不容易辨別，市場(chǎng)上流通著大量牛血清的假貨，這些假貨往往集中在一些售價(jià)高，比較好賣的進(jìn)口知名品牌。若我們科研人員一旦買到了假貨，會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和進(jìn)度。
為了盡可能避免買到假貨血清，四季青小助理建議您選擇有官方授權(quán)或確認(rèn)可靠的經(jīng)銷商處采購(gòu)血清，能很大程度降低買到假貨的概率，條件允許的情況下從官方直接采購(gòu)是最穩(wěn)妥的選擇。
